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PAS染色全稱為過典酸雪夫氏染色(schiff periodic acid shiff, PAS),又稱糖原染色。一般用來顯示糖原和其它多糖物質(zhì)。
染色原理
細(xì)胞胞漿中存在糖原或多糖類物質(zhì)(如糖蛋白、粘多糖、糖脂、粘蛋白等),過典酸能使細(xì)胞內(nèi)的多糖乙二醇基氧化為二醛基,其與Schiff試劑中的無色品紅結(jié)合后呈現(xiàn)紫紅色,沉積在細(xì)胞內(nèi)多糖所在之處。
染色步驟
1、組織石蠟包埋切片后脫蠟至水,蒸餾水洗2min(細(xì)胞爬片4%多巨甲醛固定后水洗);
2、滴加過典酸溶液,氧化5min;
3、蒸餾水洗10min;
4、滴加Schiff試劑,侵染10-20min;
5、傾去Schiff 試劑,流水沖洗10min;
6、滴加蘇木素染色液,染核1-2min;
7、流水沖洗5min;
8、酸性乙醇分化液分化;
9、Scott反藍(lán)水洗3min;
10、常規(guī)透明、封片。
染色結(jié)果
PAS染色結(jié)果
糖原、多糖類物質(zhì)及其他PAS反應(yīng)陽性物質(zhì)呈紫紅色,細(xì)胞核呈藍(lán)色。
注意事項(xiàng)
1、高典酸溶液為透明溶液,配制后放4度冰箱備用,無法從常規(guī)的顏色辨別高典酸的好壞,需要定期更換;
2、染色試劑均應(yīng)低溫保存,臨用前半小時取出恢復(fù)室溫;
3、Schiff染液染色時間可隨溫度調(diào)整,室溫高可減少染色時間,冬季室溫低,可延長至20 min左右。
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