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項(xiàng)目介紹:
掃描電鏡(SEM)利用電子和物質(zhì)的相互作用,可以獲取被測(cè)樣品本身的各種物理、化學(xué)性質(zhì)的信息,如形貌、組成、晶體結(jié)構(gòu)、電子結(jié)構(gòu)和內(nèi)部電場(chǎng)或磁場(chǎng)等等。掃描電子顯微鏡對(duì)二次電子、背散射電子的采集,可直接利用樣品表面材料的物質(zhì)性能進(jìn)行微觀成像,可得到有關(guān)物質(zhì)微觀形貌的信息。掃描電鏡有較高的放大倍數(shù),20-20萬(wàn)倍之間連續(xù)可調(diào);有很大的景深,視野大,成像富有立體感,可直接觀察各種試樣凹凸不平表面的細(xì)微結(jié)構(gòu);試樣制備簡(jiǎn)單,不含水的樣本可以不用固定。
掃描電鏡廣泛用于植物學(xué)、動(dòng)物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、微生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、材料科學(xué)、冶金等諸多學(xué)科中物體組織表面或斷面的精細(xì)結(jié)構(gòu)研究。常見(jiàn)可觀察細(xì)胞表面、植物木質(zhì)部、葉面、動(dòng)物毛纖維、病毒顆粒、外泌體、治病蟲(chóng)害、生物醫(yī)學(xué)材料、晶體材料、細(xì)菌、真菌等。
實(shí)驗(yàn)流程:
脫水-干燥-噴金-拍照
結(jié)果展示:
送樣運(yùn)輸要求:
掃描電鏡樣本準(zhǔn)備方法及要求
1、動(dòng)植物組織樣本
①1-3min內(nèi)取樣,組織塊不超過(guò)3mm2,用PBS輕輕漂洗將樣本表面的血污,毛發(fā)等去掉,將需要掃描的面做好標(biāo)記(如在對(duì)面進(jìn)行剪角處理)。
②取材時(shí)一定注意避免鑷子擠壓等機(jī)械損傷,刀片要鋒利避免挫傷組織。尤其是注意保護(hù)掃描面。
③組織取下后立即投入電鏡固定液內(nèi)室溫固定2h,再轉(zhuǎn)移至4°保存,4°冰袋運(yùn)輸,在保存和運(yùn)輸過(guò)程中固定液切勿冷凍結(jié)冰。
④植物樣本放入固定液后需抽氣沉底。
2、細(xì)胞樣本
貼壁細(xì)胞:細(xì)胞必須貼壁于蓋玻片上制成爬片,細(xì)胞棄培養(yǎng)基,用PBS輕輕漂洗后,棄PBS加電鏡固定液室溫固定2h,再轉(zhuǎn)移至4°保存,4°冰袋運(yùn)輸,在保存和運(yùn)輸過(guò)程中固定液切勿冷凍結(jié)冰。
懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞要肉眼可見(jiàn)細(xì)胞沉淀米粒大小,棄培養(yǎng)基后用PBS輕輕漂洗后,棄PBS加電鏡固定液,細(xì)胞必須吹散懸浮于固定液內(nèi),室溫固定2h,再轉(zhuǎn)移至4°保存,4°冰袋運(yùn)輸,在保存和運(yùn)輸過(guò)程中固定液切勿冷凍結(jié)冰。
3、細(xì)菌樣本
固體培養(yǎng)基的細(xì)菌:細(xì)菌必須貼壁于蓋玻片上制成爬片,用蓋玻片輕輕覆蓋在菌落上,在培養(yǎng)箱培養(yǎng)一晚上,第二天輕輕揭下來(lái),放入固定液中室溫固定2h,再轉(zhuǎn)移至4°保存, 4°冰袋運(yùn)輸,在保存和運(yùn)輸過(guò)程中固定液切勿冷凍結(jié)冰。
懸浮細(xì)菌孢子等:離心收集細(xì)菌要肉眼可見(jiàn)細(xì)菌沉淀芝麻至綠豆大小,棄培養(yǎng)基后用PBS輕輕漂洗后,棄PBS加電鏡固定液,必須吹散懸浮于固定液內(nèi),室溫固定2h,再轉(zhuǎn)移至4°保存,4°冰袋運(yùn)輸,在保存和運(yùn)輸過(guò)程中固定液切勿冷凍結(jié)冰。
4、其他如粉末狀材料
直接準(zhǔn)備干燥的粉劑。帶有磁性的金屬材料不能做掃描電鏡。
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